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高丝氨酸内酯检测

维百瑞检测提供14种高丝氨酸内酯检测,检测灵敏度可达0.1ng/ml,适用于菌落组成及微生物群体感应效应研究。

服务简介

群体感应是一种细菌细胞间信息传递的机制,即细菌在生长繁殖过程中通过合成、分泌自诱导物(AI)作为信号分子来检测自身细菌浓度。当AI浓度随着细菌群体密度达到一定阈值时,细菌便开启细胞密度依赖的特定基因表达机制。目前,已发现许多细菌利用该系统调控体内特定的功能,如生物发光、生物被膜形成、毒素产生、胞外酶合成等。革兰氏阴性细菌中群体感应信号分子主要为高丝氨酸内酯类( N-acyl-L- homoserine lactones,AHLs)。维百瑞检测提供14种高丝氨酸内酯检测,检测灵敏度可达0.1ng/ml,适用于菌落组成及微生物群体感应效应研究。


应用领域

研究细菌群体感应

抗菌药物开发

植物免疫研究


技术优势

1. 高性能仪器:LX50-QSight420 UPLC-MSMS system,灵敏度可达ng/mL级

2. 高通量,可检测10种高丝氨酸内酯

3. 标准品绝对定量,提供每个化合物的标准曲线

4. 服务周到,提供售前咨询、售后技术支持

 

质控说明

每批样品应测定10%的平行样品。


检测指标

指标

英文

检测方法

样品要求

N-丁酰基-L-高丝氨酸内酯

N-butyryl-L-Homoserine lactone

HPLC-MSMS

血清、尿液、组织、土壤

N-己酰基L-高丝氨酸内酯

N-hexanoyl-L-Homoserine lactone

N-辛酰基L-高丝氨酸内酯

N-octanoyl-L-Homoserine lactone

N-癸酰基L-高丝氨酸内酯

N-decanoyl-L-Homoserine lactone

N-十二酰基L-高丝氨酸内酯

N-dodecanoyl-L-Homoserine lactone

N-十四酰基L-高丝氨酸内酯

N-tetradecanoyl-L-Homoserine lactone

N-十六烷酰基-L-高丝氨酸内酯

N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone

N-十八烷酰基-L-高丝氨酸内酯

N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone

N-3-氧代-己酰基L-高丝氨酸内酯

N-3-oxo-homoserine lactone

N-3-氧代-辛酰基L-高丝氨酸内酯

N-3-oxo-octanoyl-L-Homoserine lactone

N-3-氧代-癸烷基L-高丝氨酸内酯

N-3-oxo-decanoyl-L-Homoserine lactone

N-3-氧代-十二烷基L-高丝氨酸内酯

N-3-oxo-dodecanoyl-L-Homoserine lactone

N-3-氧代-十四烷基L-高丝氨酸内酯

N-3-oxo-tetradecanoyl-L-Homoserine lactone

N-3-氧代-十六酰基L-高丝氨酸内酯

N-3-oxo-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone

 

服务流程

 

检测方法

HPLC-MSMS,即高效液相色谱串联质谱联用技术(High-Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry),是一种结合了高效液相色谱(HPLC)的分离能力和质谱(MS)的高灵敏度、高选择性检测能力的分析技术。它通过液相色谱系统将待测物质分离后接入质谱仪,待测物质离子化后转成电信号经计算机数据处理后,根据质谱峰进行分析。这种技术特别适用于分析非挥发性和热不稳定的化合物,能够提供准确的数据。


检测仪器

LX50-QSight420-UPLC-MSMS

 

采用StayClean技术:通过持续的热气流使得离子进入孔口。防止离子碰撞侧壁和沉积从而产生污染,显著的增加了运行时间;

热表面诱导去溶剂(HSID)技术:使层流气体能够保护离子避免碰撞侧壁,高温的气体有助于防止离子成簇,并进一步促进脱溶剂化;

专利碰撞池:实现高效、快速、无串扰的碰撞;

高质量的精密过滤器:提供高度稳定,精确的质量过滤,更能适用临床复杂基质、复杂小分子化合物痕量检测需求,保障每个检测结果的准确性。


 

取样及储存运输

血清取样:血液采集可分为静脉采血、动脉采血,按采血方式又可分为普通采血法和真空采血法。根据研究需求选择适宜的采血方式。采用洁净的 5 ml 非抗凝管采集新鲜全血 3 ml,并标记清楚编号。将采集到的全血室温下放置 30-60 min(切勿振荡采集管)。 凝血后,将采集管置于 4 ℃离心机中离心(1500 g,10-15 min)。如不能及时处理,需在 4 ℃冰箱中保存,不超过 2 h。离心后的上清液即为血清,用移液器小心吸取上清,分装至洁净的标记好的冻存管中,全程冰上操作。分装好后建议将样品置于液氮速冻 30 s。速冻后转移至-80 ℃冰箱中保存。 保存时间建议不超过 2 年,样品保存期间避免反复冻融。注意检查血清中是否有溶血,如果发生溶血需要重新采样

血清寄送:建议自封袋或者离心管包装,样品放置于干冰泡沫箱,根据寄送距离与时间,选择合适大小的泡沫盒与干冰(1 天(5kg)2-3 天(10-20kg)3-5 天(20-30kg)),并密封。

 

尿液取样:取尿液大于 1mL,在 4℃保存,静置;取 1mL 尿液进行离心分离,4℃条件下, 10000rpm,离心 5min;吸取上清液 100uL 分装于合适的已编号的 EP 管中, 如此重复分装成多管以避免反复冻融,尽快将尿液保存于-80℃冰箱中

尿液样品寄送:样品放置于干冰泡沫箱,根据寄送距离与时间,选择合适大小的泡沫盒与干冰(1 天(5kg)2-3 天(10-20kg)3-5 天(20-30kg),并密封。

 

组织取样:切割下目标样品,取大约 200mg 以上质量的组织样本,用生理盐水清洗组织,滤纸吸干表 面液体,将每 100mg 组织样本分装入管中以避免反复冻融,尽快将组织样本保存于液氮速 冻。速冻后的组织存放在-80℃冰箱中。

组织样品寄送:样品放置于干冰泡沫箱,根据寄送距离与时间,选择合适大小的泡沫盒与干冰(1 天(5kg)2-3 天(10-20kg)3-5 天(20-30kg),并密封。

 

土壤取样:农田种植一般农作物0-20cm, 果木园林0-60cm通过挖掘法和钻孔法采样,深层采样按土壤发生层次采土。采样前要进行现场勘察和有关资料的收集,根据土壤类型、肥力等级和地形等因素将采样区域划分为若干个采样单元,每个采样单元的土壤性状要尽可能均匀一致。按照“随机”、“等量”和“多点混合”的原则进行采集。新鲜样品要及时送回室内进行处理分析,挑出样品内的石块植物残体等侵入物,并用粗玻璃棒或塑料棒将样品混匀后将样品按指标分装。在点完样品后,可将新鲜样品装入自封袋,并扎紧袋口,放入冰箱冷冻室冷冻。

土壤样品寄送:将样本保存自封袋(或离心管等),扎紧袋口,并使用油性记号笔填写样本编号。样品放置于干冰泡沫箱,根据寄送距离与时间,选择合适大小的泡沫盒与干冰(1 天(5kg)2-3 天(10-20kg)3-5 天(20-30kg),并密封。


案例展示

实验流程

(1)将单个样品研磨至粉碎,准确称量粉碎后的样品于玻璃试管中,加入10mL乙酸乙酯溶液,充分混匀;

(2)摇床在4℃条件下提取1小时,12000 g离心5 min,取上清;

(3)沉淀再次加入乙酸乙酯,共提取三次,合并所得上清液;

(4)氮气吹干,以200 μl甲醇复溶,过0.22 μm有机相滤膜,放入-20℃冰箱待上机检测。


原始谱图展示

 

 

 



高丝氨酸内酯检测
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