花生四烯酸代谢检测

服务简介

花生四烯酸（arachidonic acid, AA）又名花生油烯酸，是一种重要的动物体必须脂肪酸，也是动物体中含量最高、分布最广的多不饱和脂肪酸。在血液、肝脏、肌肉和其他器官系统中作为磷脂结合的结构脂类起重要作用，是许多循环二十烷酸衍生物的生物活性物质，如前列腺素E2（PGE2）、前列腺环素（PGI2）、血栓烷素A2（TXA2）和白细胞三烯和C4（LTC4）的直接前体。这些生物活性物质对脂质蛋白的代谢、血液流变学、血管弹性、白细胞功能和血小板激活等具有重要的调节作用。目前，花生四烯酸在保健食品、化妆品和医药等领域得到广泛的利用。

应用领域

动物生长发育研究

病理机制研究

疾病标志物研究

药物效果评价

技术优势

1. 高性能仪器：LX50-QSight420 UPLC-MSMS system，灵敏度可达ng/mL级

2. 高通量，可检测22种花生四烯酸

3. 标准品绝对定量，提供每个化合物的标准曲线

4. 服务周到，提供售前咨询、售后技术支持

质控说明

每批样品应测定10%的平行样品。

检测指标

服务流程

检测方法

HPLC-MSMS，即高效液相色谱串联质谱联用技术（High-Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry），是一种结合了高效液相色谱（HPLC）的分离能力和质谱（MS）的高灵敏度、高选择性检测能力的分析技术。它通过液相色谱系统将待测物质分离后接入质谱仪，待测物质离子化后转成电信号经计算机数据处理后，根据质谱峰进行分析。这种技术特别适用于分析非挥发性和热不稳定的化合物，能够提供准确的数据。

检测仪器

LX50-QSight420-UPLC-MSMS

采用StayClean技术：通过持续的热气流使得离子进入孔口。防止离子碰撞侧壁和沉积从而产生污染，显著的增加了运行时间;

热表面诱导去溶剂（HSID）技术：使层流气体能够保护离子避免碰撞侧壁，高温的气体有助于防止离子成簇，并进一步促进脱溶剂化；

专利碰撞池：实现高效、快速、无串扰的碰撞；

高质量的精密过滤器：提供高度稳定，精确的质量过滤，更能适用临床复杂基质、复杂小分子化合物痕量检测需求，保障每个检测结果的准确性。

取样及储存运输

血清取样：血液采集可分为静脉采血、动脉采血，按采血方式又可分为普通采血法和真空采血法。根据研究需求选择适宜的采血方式。采用洁净的 5 ml 非抗凝管采集新鲜全血 3 ml，并标记清楚编号。将采集到的全血室温下放置 30-60 min（切勿振荡采集管）。 凝血后，将采集管置于 4 ℃离心机中离心(1500 g，10-15 min)。如不能及时处理，需在 4 ℃冰箱中保存，不超过 2 h。离心后的上清液即为血清，用移液器小心吸取上清，分装至洁净的标记好的冻存管中，全程冰上操作。分装好后建议将样品置于液氮速冻 30 s。速冻后转移至-80 ℃冰箱中保存。 保存时间建议不超过 2 年，样品保存期间避免反复冻融。注意检查血清中是否有溶血，如果发生溶血需要重新采样

血清寄送：建议自封袋或者离心管包装，样品放置于干冰泡沫箱，根据寄送距离与时间，选择合适大小的泡沫盒与干冰（1 天（5kg）2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg）），并密封。

尿液取样：取尿液大于 1mL，在 4℃保存，静置;取 1mL 尿液进行离心分离，4℃条件下， 10000rpm，离心 5min;吸取上清液 100μL 分装于合适的已编号的 EP 管中， 如此重复分装成多管以避免反复冻融，尽快将尿液保存于-80℃冰箱中

尿液样品寄送：样品放置于干冰泡沫箱，根据寄送距离与时间，选择合适大小的泡沫盒与干冰（1 天（5kg）2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。

组织取样：切割下目标样品，取大约 200mg 以上质量的组织样本，用生理盐水清洗组织，滤纸吸干表 面液体，将每 100mg 组织样本分装入管中以避免反复冻融，尽快将组织样本保存于液氮速 冻。速冻后的组织存放在-80℃冰箱中。

组织样品寄送：样品放置于干冰泡沫箱，根据寄送距离与时间，选择合适大小的泡沫盒与干冰（1 天（5kg）2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。

案例展示

血清样品

(1) 样品处理避光条件下精密吸取血浆90uL,置于1.5 mL离心管中,加入甲醇5 μL,涡旋30 s

(2) 加入乙酸乙酯500 pL,涡旋3 min,静置1 min

(3) 4 ℃下20000转/分钟离心5 min

(4) 移取上清液于10 mL带盖玻璃试管中,常温下氮气吹干

(5) 用200 pL流动相溶解残渣,涡旋30s后转移至1.5 mL离心管中

(6) 4 ℃下20000转/分钟离心5 min

(7) 取上清液过0.22μm滤膜，进行HPLC - MS/MS分析。

固体组织样品

(1) 将固体样品在液氮环境下研磨至粉碎

(2) 取约100 mg各组织样品,生理盐水冲洗,滤纸吸干后称重

(3) 加入 500μL甲醇(含0 01 molL BHT)和10μL甲酸,混匀,匀浆器匀浆,超声破碎细胞(工作时间3 s,间隙时间2s,工作60次,功率400 W)。上述过程在冰浴中进行。

(4) 4C离心20 min（15000 r/m in）

(5) 取出上清液,加入700μL水、l mL乙酸乙酯,涡旋30 s

(6) 12000 r/min离心10 min

(7) 取出有机相,水相再萃取一次,合并乙酸乙酯层,冻干溶剂

(8) 残留物用200μL甲醇溶解

(9) 4 ℃下20000转/分钟离心5 min

(10) 取上清液过0.22μm滤膜，进行HPLC - MS/MS分析

部分指标EIC图