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酚酸组分检测

维百瑞检测建立了以液质联用同时检测24种土壤酚酸的体系,土壤酚酸分为游离态酚酸与结合态酚酸,其中游离酚酸是以酚酸单体形式游离在土壤中的酚酸,可以直接以极性溶剂溶解出来;而结合态酚酸是与土壤中其它物质紧密结合的酚酸,需要以NaOH水解释放出来。

产品详情

植物酚酸类物质,作为植物体内一类重要的次生代谢产物,具有多种生物活性和药理作用。这类物质不仅广泛存在于植物的种子、叶、根、茎中,还扮演着抗氧化、抗菌和调节植物生长等多重角色。很多研究证实,土壤酚酸可能是植物化感自毒作用的重要原因。维百瑞检测建立了以液质联用同时检测23种酚酸的体系,用于生命科学基础研究。


检测范围

土壤、植物样本


应用领域

农学:植物生长发育和诱导抗性、植物化感作用

环境科学:酚酸类化合物对土壤中微生物的组成和土壤中酶的活性有影响,因此在环境科学中,植物酚酸检测有助于评估土壤质量和植物对环境的适应性。

食品科学:植物源性食品中对多酚类物质进行定性和定量分析,为开发新型食品提供助力。

 

技术优势

高性能仪器:LX50-QSight420 UPLC-MSMS system,灵敏度可达ng/mL级

 

质控说明

每批样品应测定10%的平行样品。

 

检测指标

指标

检测方法

样品要求

邻苯二酚

HPLC-MSMS

土壤或植物鲜样

香草醛

丁香醛

邻香豆酸

对香豆酸

山奈酚

儿茶素

芦丁

对羟基苯甲酸

阿魏酸

香草酸

丁香酸

苯甲酸

邻苯二甲酸

绿原酸

咖啡酸

奎宁酸

没食子酸

原儿茶酸

芥子酸

齐墩果酸

原儿茶醛

表儿茶素

 

服务流程


检测方法

HPLC-MSMS,即高效液相色谱串联质谱联用技术(High-Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry),是一种结合了高效液相色谱(HPLC)的分离能力和质谱(MS)的高灵敏度、高选择性检测能力的分析技术。它通过液相色谱系统将待测物质分离后接入质谱仪,待测物质离子化后转成电信号经计算机数据处理后,根据质谱峰进行分析。这种技术特别适用于分析非挥发性和热不稳定的化合物,能够提供准确的数据。


检测仪器

LX50-QSight420-UPLC-MSMS

 采用StayClean技术:通过持续的热气流使得离子进入孔口。防止离子碰撞侧壁和沉积从而产生污染,显著的增加了运行时间;

热表面诱导去溶剂(HSID)技术:使层流气体能够保护离子避免碰撞侧壁,高温的气体有助于防止离子成簇,并进一步促进脱溶剂化;

专利碰撞池:实现高效、快速、无串扰的碰撞;

高质量的精密过滤器:提供高度稳定,精确的质量过滤,更能适用临床复杂基质、复杂小分子化合物痕量检测需求,保障每个检测结果的准确性。

 

取样及储存运输

土壤样品

1.取样

    土壤一般分为表层土壤和深层土壤两种,不同类型的样本处理方式有所差异,具体如下:

    表层采样

        应用:一般用于农业用地或者耕地的调查

        采样深度: 农田种植一般农作物0-20cm, 果木园林0-60cm采样方法: 挖掘法和钻孔法

    深层采样

        应用:土壤详查、物质迁移扩散、污染物调查等

        采样方式:按土壤发生层次采土

    布点原则

        采样前要进行现场勘察和有关资料的收集,根据土壤类型、肥力等级和地形等因素将采样区域划分为若干个采样单元,每个采样单元的土壤性状要尽可能均匀一致。按照“随机”、“等量”和“多点混合”的原则进行采集。

        “随机”即每一个采样点都是任意决定的,使采样单元内的所有点都有同等机会被采到。

        “等量”是要求每一点采集土样深度要一致,采样量要一致。

        “多点混合”是指把一个采样单元内各点所采集的样品均匀混合构成一个混合样品,以提高样品的代表性,一个混合样品由 15~20 个样点组成。

2.处理

    样品的处理为了能真实地反映土壤在田间自然状态下的某些理化性状,新鲜样品要及时送回室内进行处理分析,挑出样品内的石块植物残体等侵入物,并用粗玻璃棒或塑料棒将样品混匀后将样品按指标分装。

    样品的保存一般营养成分的样品,在点完样品后,可将新鲜样品装入自封袋,并扎紧袋口,放入冰箱冷冻室冷冻。

    3.运输

    ①填写样本信息单,发送邮件并打印纸质版;

    ②将样本保存自封袋(或离心管等),扎紧袋口,并使用油性记号笔填写样本编号;

    ③样本外部用缓冲膜包裹,防止直接接触干冰引发结冰;

    ④选择厚度不低于3cm的泡沫盒,底部先放入一部分干冰;

    ⑤放入样本与打印的样本信息单;

    ⑥根据寄送距离与时间,选择合适大小的泡沫盒与不少于15kg的干冰(具体请按样品量以及距离的远近,酌情进行增减),并密封。


植物样品

1.取样

    每类样品采集至少4~5个生物学重复,以保证样株具有充分代表性;

    每个样品的样品量为至少为分析所用样品量的两倍量以上,剩余样品将进行保存以备重新分析用;

    采样过程中要迅速,以使植物体内的各种酶失活,保证其代谢状态终止于采样时的状态;

    采样时用干净的的剪刀迅速剪下所需部位,采样时应记录样品的生长期、生长条件、采样部位及其相关生物学背景介绍;

2.处理

    用去离子水清理样本表面杂质,滤纸吸干水分,取样后放入离心管、冻存管或铝箔纸包裹,立即放入液氮速冻,并保存于-80℃冰箱中

    样品编号要尽可能的简短清晰,不要添加特殊字符等标识,因为仪器无法输入太多字符。所有盛装样品用的管子需在常温下用马克笔清晰标注样品名称,低温下写的编号容易模糊。

3.运输

    干冰运输。(如样品存放在离心管中,则务必需 在管盖等部位扎上小洞,以防样品受热后盖子崩开,形成安全隐患或造成样品 损失。)

 

案例展示

实验流程

(1) 取1 g 土壤样品,加入5 ml 1M NaOH,在震荡摇床上4℃提取16 h;

(2) 10000 g 离心 5 min,取上清,沉淀加5 ml NaOH超声30 min;

(3) 10000 g 离心 5 min,取上清,合并两次上清;

(4) 以浓盐酸将PH调节至2.0(取10mL液体样品直接调节PH调节至2.0),加入5 ml乙

酸乙酯,在涡旋振荡器上涡旋一分钟萃取,取上层乙酸乙酯相,萃取3次;

(5) 收集乙酸乙酯相,加入1 g无水MgSO4以去除其中残留的水分,10000 g离心2 min,

取上清,氮气吹干,0.4ml甲醇复溶,过0.22 μm滤膜,待上机检测。


原始图谱


检测结果

原始编号

MH-1

MH-2

ML-1

ML-2

MS-1

MS-2

样品编号

 C1-1

C1-2(技术重复质控)

 C2

C3

 C4

C5

 C6

检测样品

定溶体积(mL)

0.400

0.400

0.400

0.400

0.400

0.400

0.400

检测样品

取样质量(g)

1.0573

1.0925

1.0452

1.0158

1.0565

1.0105

1.0387

18-Syringate丁香酸

检测浓度(ng/mL)

1984.67

2068.28

1879.15

1280.46

1432.52

1762.97

1724.88

每克样品含量(ng/g)

750.84

757.26

719.15

504.22

542.36

697.86

664.25

17-Ferulic acid阿魏酸

检测浓度(ng/mL)

722.04

734.52

748.17

524.49

480.67

531.42

479.56

每克样品含量(ng/g)

273.16

268.93

286.33

206.53

181.99

210.36

184.68

16-Quinic acid奎宁酸

检测浓度(ng/mL)

6.75

7.77

7.30

10.52

9.36

5.21

6.32

每克样品含量(ng/g)

2.55

2.84

2.79

4.14

3.54

2.06

2.43

14-Caffeic acid咖啡酸

检测浓度(ng/mL)

251.04

249.67

218.53

218.94

263.84

291.33

274.19

每克样品含量(ng/g)

94.97

91.41

83.63

86.21

99.89

115.32

105.59

13-Gallic acid 没食子酸

检测浓度(ng/mL)

10.58

11.46

10.12

7.05

8.52

6.16

7.62

每克样品含量(ng/g)

4.00

4.20

3.87

2.78

3.23

2.44

2.93

11-Phthalic acid邻苯二甲酸

检测浓度(ng/mL)

14863.03

15440.26

13633.41

5735.67

5019.34

3238.96

3701.99

每克样品含量(ng/mL)

5623.01

5653.18

5217.53

2258.58

1900.37

1282.12

1425.62

Protocatechuic acid原儿茶酸

检测浓度(ng/mL)

98.79

100.68

87.81

65.55

66.92

72.68

63.77

每克样品含量(ng/g)

37.37

36.86

33.61

25.81

25.34

28.77

24.56

10-p-Coumaric acid 对香豆酸

检测浓度(ng/mL)

1746.94

1758.44

1614.75

1133.59

1075.30

1223.55

1165.53

每克样品含量(ng/g)

660.91

643.82

617.97

446.38

407.12

484.33

448.84

9-o-Coumaric acid邻香豆酸

检测浓度(ng/mL)

2.17

1.91

1.60

1.32

1.03

1.21

1.68

每克样品含量(ng/g)

0.82

0.70

0.61

0.52

0.39

0.48

0.65

1-Catechol邻苯二酚

检测浓度(ng/mL)

5.25

6.51

5.70

7.12

5.98

6.27

5.21

每克样品含量(ng/g)

1.99

2.38

2.18

2.80

2.26

2.48

2.01

2-Benzoic acid苯甲酸

检测浓度(ng/mL)

17216.30

18288.56

16248.48

6483.40

5913.17

3698.32

4298.73

每克样品含量(ng/g)

6513.31

6696.04

6218.32

2553.02

2238.78

1463.96

1655.43

4-para-hydroxybenzoic acid对羟基苯甲酸

检测浓度(ng/mL)

4172.17

4335.61

3608.55

2877.26

3045.62

3340.42

3412.77

每克样品含量(ng/g)

1578.42

1587.41

1381.00

1133.00

1153.10

1322.28

1314.25

3-Protocatechualdehyde原儿茶醛

检测浓度(ng/mL)

51.93

58.79

61.46

38.81

32.63

35.50

31.24

每克样品含量(ng/g)

19.65

21.52

23.52

15.28

12.35

14.05

12.03

15-Syringal丁香醛

检测浓度(ng/mL)

705.94

710.07

611.39

455.46

482.77

537.90

499.97

每克样品含量(ng/g)

267.07

259.98

233.98

179.35

182.78

212.92

192.54

19-Sinapic acid 芥子酸

检测浓度(ng/mL)

32.69

32.52

32.54

24.22

33.67

25.85

24.23

每克样品含量(ng/g)

12.37

11.91

12.45

9.54

12.75

10.23

9.33

20-Kaempferol山奈酚

检测浓度(ng/mL)

0.40

0.34

0.29

0.61

0.51

0.24

0.29

每克样品含量(ng/g)

0.15

0.12

0.11

0.24

0.19

0.10

0.11

21-Epicatechin 表儿茶素

检测浓度(ng/mL)

5.26

5.02

4.11

6.96

8.74

5.04

4.54

每克样品含量(ng/g)

1.99

1.84

1.57

2.74

3.31

2.00

1.75

22-Catechin儿茶素

检测浓度(ng/mL)

3.10

2.55

2.44

1.69

2.11

1.10

1.43

每克样品含量(ng/g)

1.17

0.93

0.93

0.67

0.80

0.44

0.55

23-Chlorogenic acid绿原酸

检测浓度(ng/mL)

0.70

0.63

0.61

0.84

0.91

0.54

0.57

每克样品含量(ng/g)

0.26

0.23

0.23

0.33

0.34

0.21

0.22

26-Rutin芦丁

检测浓度(ng/mL)

0.41

0.37

0.49

0.35

0.45

0.59

0.46

每克样品含量(ng/g)

0.16

0.14

0.19

0.14

0.17

0.23

0.18

12-Vanillic acid 香草酸

检测浓度(ng/mL)

2771.85

3177.40

2917.41

2483.26

2760.68

3388.29

3583.72

每克样品含量(ng/mL)

1048.65

1163.35

1116.50

977.85

1045.22

1341.23

1380.08

25-Oleanolic acid 齐墩果酸

检测浓度(ng/mL)

7.18

8.08

6.37

6.41

8.42

4.82

4.18

每克样品含量(ng/g)

2.72

2.96

2.44

2.52

3.19

1.91

1.61

香草醛

检测浓度(ng/mL)

696.76

730.80

645.14

565.99

546.88

625.55

564.24

每克样品含量(ng/g)

263.60

267.57

246.90

222.87

207.05

247.62

217.29

 


酚酸组分检测
维百瑞检测建立了以液质联用同时检测24种土壤酚酸的体系,土壤酚酸分为游离态酚酸与结合态酚酸,其中游离酚酸是以酚酸单体形式游离在土壤中的酚酸,可以直接以极性溶剂溶解出来;而结合态酚酸是与土壤中其它物质紧密结合的酚酸,需要以NaOH水解释放出来。
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