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核苷酸检测

核苷酸是一类由碱基(主要是嘌呤、嘧啶的衍生物)、戊糖(核糖和脱氧核糖)和磷酸三种物质组成的化合物、核苷酸及其衍生物广泛参与生物体内各类生物化学反应,如三磷酸腺苷(ATP),是生命活动广泛需要的能源。

产品详情

核苷酸是一类由碱基(主要是嘌呤、嘧啶的衍生物)、戊糖(核糖和脱氧核糖)和磷酸三种物质组成的化合物、核苷酸及其衍生物广泛参与生物体内各类生物化学反应,如三磷酸腺苷(ATP),是生命活动广泛需要的能源。核苷酸的代谢紊乱与多种疾病的发生和发展密切相关,如肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等,因此核苷酸的检测十分重要。


检测范围

生物液体:包括血液、尿液、唾液等; 微生物样本;食品样本:如调味品、酵母提取物、乳制品等

农产品:包括谷物、水果、蔬菜等。


应用领域

疾病诊断与预测

药物研发

遗传学研究

 

服务优势

1、高性能仪器:LX50-QSight420 UPLC-MSMS system,灵敏度可达ng/mL级

2、售前售后全程提供技术支持;

3、检测样品免费提供预处理服务;

4、检测结果可靠,免费做平行质控和标准物质质控。

 

服务内容

大类

指标

检测方法

样品要求

脱氧核糖核苷酸

dTTP、dATP、dCTP、dGTP

HPLC/HPLC-MSMS

新鲜样品

核苷酸

ADP、ATP、AMP、GTP、GDP

 

服务流程

 

检测方法

HPLC-MSMS:高效液相色谱串联质谱联用技术(High-Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry),是一种结合了高效液相色谱(HPLC)的分离能力和质谱(MS)的高灵敏度、高选择性检测能力的分析技术。它通过液相色谱系统将待测物质分离后接入质谱仪,待测物质离子化后转成电信号经计算机数据处理后,根据质谱峰进行分析。这种技术特别适用于分析非挥发性和热不稳定的化合物,能够提供准确的数据。

HPLC:高效液相色谱法,是一种基于溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。随后各组分经过检测器转化成电信号,经计算机数据处理后获得各组分的准确数据。

 

检测仪器

 


质控说明

平行质控:

每批样品应测定10%的平行样品。

 


样品采集、处理、运输

1. 取样及处理

植物鲜样:取样后,及时去除样品上的泥土和灰尘,柔软湿布擦净或流水冲洗完成后,用吸水纸吸走多余的水分后,放置离心管密封后并标记,放入液氮中速冻15-20分钟后,-80℃保存。

不同类型的植物样本处理方式:

    ①地上部分:幼嫩叶片和花瓣等组织直接取样,装进15ml或50ml离心管。

    ②地下组织(根、块茎等):取样后,快速用灭菌水或流水冲洗,用吸水纸吸走多余的水分后,快速装进15ml或50ml离心管。

    ③果肉组织:利用工具将果肉切成1-2cm块状大小,快速装进15ml或50ml离心管。

    ④种子:先将同一组的植株种子混匀后再分装至离心管中。

血清样本:血液采集可分为静脉采血、动脉采血,按采血方式又可分为普通采血法和真空采血法。根据研究需求选择适宜的采血方式。采用洁净的 5 ml 非抗凝管采集新鲜全血 3 ml,并标记清楚编号。将采集到的全血室温下放置 30-60 min(切勿振荡采集管)。 凝血后,将采集管置于 4 ℃离心机中离心(1500 g,10-15 min)。如不能及时处理,需在 4 ℃冰箱中保存,不超过 2 h。离心后的上清液即为血清,用移液器小心吸取上清,分装至洁净的标记好的冻存管中,全程冰上操作。分装好后建议将样品置于液氮速冻 30 s。速冻后转移至-80 ℃冰箱中保存。 保存时间建议不超过 2 年,样品保存期间避免反复冻融。注意检查血清中是否有溶血,如果发生溶血需要重新采样

尿液样本:取尿液大于 1mL,在 4℃保存,静置;取 1mL 尿液进行离心分离,4℃条件下, 10000 rpm,离心 5 min;吸取上清液 100 uL 分装于合适的已编号的 EP 管中, 如此重复分装成多管以避免反复冻融,尽快将尿液保存于-80℃冰箱中。

 

2. 样品寄送

用锡箔纸、离心管包装,使用油性记号笔填写样本编号,再装入自封袋中,避免样品包装破损样品散落。选择合适大小的泡沫盒,干冰用量1 天(5kg),2-3 天(10-20kg)3-5 天(20-30kg),并密封。

 

案例展示

实验流程

(1) 将客户提供样品于液氮中研磨至粉末,准确称取约1g样品于试管中;

(2) 加入6 mL提取液,冰水浴超声提取0.5 h;

(3) 10000 g,4℃,离心5 min,取2mL上清液,调节pH至6.8;

(4) 以超纯水定容至25mL,冰水浴超声提取0.5 h;

(5) 取1mL提取液,过0.22 µm滤膜,进HPLC-MS/MS检测。


原始图谱

核苷酸检测
核苷酸是一类由碱基(主要是嘌呤、嘧啶的衍生物)、戊糖(核糖和脱氧核糖)和磷酸三种物质组成的化合物、核苷酸及其衍生物广泛参与生物体内各类生物化学反应,如三磷酸腺苷(ATP),是生命活动广泛需要的能源。
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