动物/昆虫激素检测

服务简介

动物激素，是由动物分泌细胞或内分泌腺分泌的一类信息传递物质，可大致分为蛋白质、RNA和固醇类物质。动物激素在动物的生长、性发育、营养代谢、细胞呼吸、生理代谢等等生理功能中都扮演了非常重要的角色。

全变态昆虫一生要经历胚胎-幼虫-蛹-成虫等发育阶段，在这周生命周期中，由于几丁质外骨骼的限制，昆虫必须通过周期性蜕皮才能完成个体生长于发育。调控昆虫蜕皮与变态的激素主要有蜕皮激素和保幼激素，两者协同作用调控基因网络的级联反应和相互作用。蜕皮激素启动和调控蜕皮与变态，保幼激素抑制蜕皮激素调节的各种分子活动，控制蜕皮的性质。

应用领域

动物激素

    病理机制研究

    疾病标志物研究

    药物效果评价

    疾病诊断研究

昆虫激素

    昆虫生长发育、滞育、变态、生殖等生理机制研究；

    生物胁迫及非生物胁迫机理研究；

    植病/虫害/稳态等机理研究；

    生物农药的开发应用等。

技术优势

高性能仪器：LX50-QSight420 UPLC-MSMS system，灵敏度可达ng/mL级

质控说明

每批样品应测定10%的平行样品。

检测指标

服务流程

检测方法

HPLC-MSMS，即高效液相色谱串联质谱联用技术（High-Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry），是一种结合了高效液相色谱（HPLC）的分离能力和质谱（MS）的高灵敏度、高选择性检测能力的分析技术。它通过液相色谱系统将待测物质分离后接入质谱仪，待测物质离子化后转成电信号经计算机数据处理后，根据质谱峰进行分析。这种技术特别适用于分析非挥发性和热不稳定的化合物，能够提供准确的数据。

检测仪器

LX50-QSight420-UPLC-MSMS

采用StayClean技术：通过持续的热气流使得离子进入孔口。防止离子碰撞侧壁和沉积从而产生污染，显著的增加了运行时间;

热表面诱导去溶剂（HSID）技术：使层流气体能够保护离子避免碰撞侧壁，高温的气体有助于防止离子成簇，并进一步促进脱溶剂化；

专利碰撞池：实现高效、快速、无串扰的碰撞；

高质量的精密过滤器：提供高度稳定，精确的质量过滤，更能适用临床复杂基质、复杂小分子化合物痕量检测需求，保障每个检测结果的准确性。

取样及储存运输

血清取样：血液采集可分为静脉采血、动脉采血，按采血方式又可分为普通采血法和真空采血法。根据研究需求选择适宜的采血方式。采用洁净的 5 ml 非抗凝管采集新鲜全血 3 ml，并标记清楚编号。将采集到的全血室温下放置 30-60 min（切勿振荡采集管）。 凝血后，将采集管置于 4 ℃离心机中离心(1500 g，10-15 min)。如不能及时处理，需在 4 ℃冰箱中保存，不超过 2 h。离心后的上清液即为血清，用移液器小心吸取上清，分装至洁净的标记好的冻存管中，全程冰上操作。分装好后建议将样品置于液氮速冻 30 s。速冻后转移至-80 ℃冰箱中保存。 保存时间建议不超过 2 年，样品保存期间避免反复冻融。注意检查血清中是否有溶血，如果发生溶血需要重新采样

血清寄送：建议自封袋或者离心管包装，样品放置于干冰泡沫箱，根据寄送距离与时间，选择合适大小的泡沫盒与干冰（1 天（5kg）2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg）），并密封。

尿液取样：取尿液大于 1mL，在 4℃保存，静置;取 1mL 尿液进行离心分离，4℃条件下， 10000rpm，离心 5min;吸取上清液 100uL 分装于合适的已编号的 EP 管中， 如此重复分装成多管以避免反复冻融，尽快将尿液保存于-80℃冰箱中

尿液样品寄送：样品放置于干冰泡沫箱，根据寄送距离与时间，选择合适大小的泡沫盒与干冰（1 天（5kg）2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。

组织取样：切割下目标样品，取大约 200mg 以上质量的组织样本，用生理盐水清洗组织，滤纸吸干表 面液体，将每 100mg 组织样本分装入管中以避免反复冻融，尽快将组织样本保存于液氮速 冻。速冻后的组织存放在-80℃冰箱中。

组织样品寄送：样品放置于干冰泡沫箱，根据寄送距离与时间，选择合适大小的泡沫盒与干冰（1 天（5kg）2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。

全虫取样：将虫子冲洗干净后快速用用吸水纸吸走多余的水分后，放置离心管密封后并标记，放入液氮中速冻15-20分钟后，-80℃保存。

全虫寄送：样品放置于干冰泡沫箱，根据寄送距离与时间，选择合适大小的泡沫盒与干冰（1 天（5kg）2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。

昆虫血淋巴取样：采用离心法收集血淋巴时,一般先使昆虫形成开放性伤口,在离心管的下段加上玻璃棉过滤器,再将昆虫伤口朝下置于离心管中,也可直接将昆虫置于离心管中,在一定的转速下离心一段时间后,从离心管底部收集血淋巴。

昆虫血淋巴寄送：样品放置于干冰泡沫箱，根据寄送距离与时间，选择合适大小的泡沫盒与干冰（1 天（5kg）2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。

案例展示

动物激素血液样本

(1) 取样品0.2mL，加入乙腈1ml，漩涡震荡30 s；

(2) 低温超声半小时，4 ℃，12000 g，离心5min，取上清液；

(3) 沉淀再次加入乙腈1ml重复提取一次；

(4) 4 ℃，12000 g，离心5 min，合并两次上清液；

(5) 以氮气吹干甲醇，剩余残渣以200 µL甲醇复溶；

(6) 过0.22 µm滤膜，进液质检测。

昆虫激素

(1) 取样品置于液氮中研磨粉碎，准确称取全部样品放入10 ml离心管中，加入2 ml乙酸乙酯；

(2) 4 ℃，水浴超声30 min，4 ℃，结束后12000 g离心5 min，取上清液；

(3) 沉淀中加入2 ml甲醇再提取一次，合并两次上清；

(4) 氮气吹干上清液，以0.2 ml甲醇复溶，过0.22 µm滤膜，进液质检测。

蜕皮激素

保幼激素3