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植物酶活检测
维百瑞检测平台可依客户需求，以elisa方法检测各类酶含量，或以生化方法检测酶活性。目前已建立的高效且稳定的酶活检测体系。检测酶活覆盖糖酵解、乙醛酸循环、氧化与抗氧化、辅酶等。
产品详情
植物体中的酶影响着植物细胞的生长、分裂、分化，并能决定植物的生根、发芽、开花、结实、休眠、脱落等。植物酶对植物的生长发育有重要的调节控制作用。维百瑞检测平台可依据客户需求，以elisa方法检测各类酶含量，或以生化试剂盒方法检测酶活性。目前已建立的高效且稳定的酶活检测体系。
检测范围
细菌或培养细胞、动植物组织、血清（浆）、果汁等样本
检测指标
| 类别 | 检测指标 |
| 氧化应激系列 | 超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧阴离子(O₂-)、羟自由基清除能力、ABTS清除能力、DPPH清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、总抗氧化能力(T-AOC)、铁离子还原能力测定、羟自由基（OH-）、抗脂质过氧化能力/LPO抑制率测定、单宁酶（Tannase）、脱氢酶(PDHA)、非蛋白质巯基(NPTs)、蛋白质羰基(PCO)、总巯基(TTs)、一氧化氮(NO)、硫化氢(H2S)、单胺氧化酶(MAO)、二胺氧化酶(DAO)、多胺氧化酶(PAO、吲哚乙酸氧化酶(IAAO)、酪氨酸解氨酶(TAL)、NADPH氧化酶（NAO、黄嘌呤氧化酶（XOD）、乙二醛酶I（Gly I）、乙二醛酶Ⅱ（Gly II）活性测定、高铁还原酶（FCR）活性测定、酚氧化酶（PO）活性测定/酪氨酸酶活性、细胞分裂素氧化酶(CKO/CKK) 活性测定、精氨酸脱羧酶(ADC)活性检测 |
| ASA-GSH循环系列 | 抗坏血酸过氧化物酶(APX)、抗坏血酸氧化酶(AAO)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)、还原型抗坏血酸(AsA)/维生素C含量、氧化型/脱氢抗坏血酸(DHA)含量、总抗坏血酸(TAA)含量测定、硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)、硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）/γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性检测、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px/GPX)、甲基乙二醛（MG）含量测试定 |
| 氮代谢系列 | 硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺酶(GLS)、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酸合成酶（GOGAT）活性检测、谷氨酸脱氢酶（GDH）活性检测、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)、谷草转氨酶/天冬氨酸氨基转氨酶(GOT/AST)、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、脲酶(UE)、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT)活性、NADH-谷氨酸合成酶(NADH-GOGAT)试剂盒-非绿色组织、Fd-谷氨酸合成酶(Fd-GOGAT)试剂盒-绿色组织、NADH-谷氨酸脱氢酶(NADH-GDH)试剂盒-植物动物均可、NADPH-谷氨酸脱氢酶(NADPH-GDH)试剂盒-酵母菌、天冬酰胺酶(ASNase/asparaginase)活性测定、天冬酰胺合成酶（ASNS)、腺苷脱氨酶（ADA)活性测、芳基酰胺酶活性测定 |
| 碳水化合物代谢系列 | α-淀粉酶、β-淀粉酶、总淀粉酶、淀粉磷酸化酶、蔗糖合成酶SS-Ⅱ(合成方向)、蔗糖合成酶SS-I(分解方向)、蔗糖磷酸化酶(SPase)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)、中性转化酶(NI)/细胞质转化酶(CIN)、可溶性酸性转化酶(S-AI)/液泡转化酶(VIN)、细胞壁不溶性酸性转化酶(B-AI)、UDPG焦磷酸化酶/尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶、ADPG焦磷酸化酶/腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶、可溶性淀粉合成酶(SSS)、结合态淀粉合成酶(GBSS)、淀粉分支酶(SBE)、淀粉去分支酶(DBE)、α-葡萄糖苷酶(α - GC)、β-葡萄糖苷酶(β-GC)/纤维二糖酶、α-半乳糖苷酶(α-GAL)、β-半乳糖苷酶(β-GAL)、β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)/β-葡萄糖醛酸酶（β-G）、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、内切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维素酶、外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)/纤维二糖苷酶、滤纸酶(FPA)、β-1,3-1,4-葡聚糖酶活测定、普鲁兰酶活性测定、漆酶(Lac)活性、内切几丁质酶、外切几丁质酶、几丁质酶活性检测、β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)、海藻糖酶(Trehalase)、海藻糖合成酶（TS）活性检测、海藻糖-6-磷酸合酶(TPS)、海藻糖-6-磷酸酯酶(TPP)、NAD+-山梨醇脱氢酶(NAD+-SDH)、NADP+-山梨醇脱氢酶(NADP+-SDH)、山梨醇氧化酶（SOX)测定、6-磷酸葡萄糖胺合成酶(GlmS)/6-磷酸果糖谷氨酰胺氨基转移酶(GFAT)、6-磷酸山梨醇脱氢酶(S6PDH)/醛糖6-磷酸还原酶(A6PR)、糖原合成酶(GCS)、糖原磷酸化酶a(GPa)、糖原磷酸化酶b(GPb)、糖化酶/葡萄糖淀粉酶、果聚糖水解酶活性测定、葡萄糖氧化酶（GOD）、β-葡聚糖含量测定、植物蔗糖酶活性检测 |
| 光合作用系列 | 二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)、植物果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)、磷酸丙糖异构酶（TPI）活性检测、植物果糖-1,6-二磷酸(酯)酶(FBP)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)、焦磷酸：果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(PFP)、叶绿体3-磷酸甘油醛脱氢酶(NADPH-GAPDH)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(NADPH-GAPDH)、乙醇酸氧化酶(GO)、丙酮酸磷酸双激酶（PPDK）活性测定、叶绿体3-磷酸甘油酸激酶(PGK)活性测定 |
| 细胞壁代谢系列 | 多聚半乳糖醛酸酶(PG)/果胶酶、果胶裂解酶(PL)、果胶甲酯酶(PE)试剂盒滴定法、离子结合型果胶(ISP)/螯合性果含量、共价结合型果胶(CSP)/碳酸钠溶性果胶含量、内切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维素酶、β-葡萄糖苷酶(β-GC)/纤维二糖酶、外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)/纤维二糖苷酶、β-半乳糖苷酶(β-GAL)、半纤维素酶/木聚糖酶、酸性木聚糖酶活性检测、中性木聚糖酶活性检测、碱性木聚糖酶活性检测、β-木糖苷酶、α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)、细胞壁结合酸性转化酶活性检测、细胞壁不溶性酸性转化酶(B-AI) |
| 苯丙烷代谢途径 | 肉桂酸4-羟基化酶(C4H)、肉桂醇脱氢酶(CAD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、4-香豆酸：辅酶A连接酶（4CL）活性检测、锰过氧化物酶(Mnp)、木质素过氧化物酶(Lip)、查尔酮异构酶（CHI）、类黄酮糖基转移酶（UFGT）活性检测、二氢黄酮醇还原酶（DFR）活性检测 |
| 磷酸戊糖途径 | 葡萄糖脱氢酶（GCDH)检测、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)活性检测、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)活性检测 |
| 维生素系列 | 维生素B1（VB1）含量检测、维生素B6检测、维生素E检测、还原型抗坏血酸(AsA)/维生素C含量、氧化型/脱氢抗坏血酸(DHA)含量、总抗坏血酸(TAA)含量测定 |
| 脂肪酸系列 | 脂肪酶（LPS）活性检测、组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测、组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测、脂氧合酶(LOX)、羧酸酯酶(CarE)活性检测、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性检测、总胆固醇(TC)含量检测、甘油三酯(TG)含量检测、甘油含量( Glycerol)试剂盒(酶法)、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量检测、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量检测、游离胆固醇(FC)含量检测、乙酰辅酶 A 羧化酶（ACC）活性检测、磷脂酶D（PLD）活性检测、磷脂酶C（PLC）活性检测、3-磷酸甘油含量测定、酰基转移酶(AAT)活性检测 |
| 糖酵解系列 | 己糖激酶(HK)活性检测、磷酸葡萄糖异构酶(PGI)/磷酸己糖异构酶(PHI)、磷酸果糖激酶(PFK)活性检测、丙酮酸激酶(PK)活性检测、丙酮酸脱羧酶(PDC)、乙醇脱氢酶(ADH)活性检测、L-乳酸（L-LA）含量检测、D-乳酸（D-LA）含量检测试剂盒（WST显色法） |
| 呼吸与能量代谢系列 | ATP含量检测、辅酶ⅠNAD+/NADH含量检测、线粒体H+- ATP酶、Na+k+——ATP酶活性检测、Ca++Mg++——ATP酶活性检测 |
| 三羧酸循环系列 | NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性检测、NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)活性检测、柠檬酸合酶(CS)活性检测、线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)活性检测、α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)活性检测、顺乌头酸酶（ACO）活性检测、琥珀酸脱氢酶(SDH)活性检测 |
| 脯氨酸代谢途径 | 谷氨酸脱羧酶(GAD) |
| 医学基础代谢指标 | 胰蛋白酶活性检测、总蛋白酶活性、胃蛋白酶活性检测、白蛋白含量检测试剂盒 |
| 离子系列 | 组织无机磷含量检测 |
| 其他系列 | 抗氟离子酸性磷酸酶（FRAP）活性检测、总黄酮醇含量检测、莽草酸脱氢酶(SD)活性检测、Elisa试剂盒、活性氧（ROS） |
应用领域
农学：作物高效栽培、遗传育种、种质资源创新、生防微生物与作物互作
生命科学：分子育种、作物品质形成和抗逆机制研究、生物化学与分子生物学、品质代谢调控与遗传改良
林学：森林生态、林木培育
园艺：果树栽培生理、果实品质
微生物：微生物群落生态学、抗逆机制研究、微生物酶生物技术
检测方法及仪器
检测方法
采用试剂盒测定酶活性
检测仪器
酶标仪（美国MD全波长酶标仪SpectraMax190）
• 精准的吸光率测读
• 光栅式光谱发生器，连续波长190-850nm
• PathCheck®技术，可把微孔板中的样品OD值转化为标准1cm光径比色皿的OD值，直接计算DNA浓度。
• 用各种酶标板，如平底板、圆底板、锥形底板等都能得到准确的结果
• 利用的恒温虚拟盖技术，能控制样品舱内的温度
• 具有功能强大的数据分析软件SoftMax Pro
分光光度计（普析T6新世纪紫外可见分光光度计）
• 超低杂散光：万分之五的杂散光指标
• 广泛的应用领域：满足卫生防疫、教学研究、环境监测、农、林业、制造业、市政机关、科研机构、勘察水利、石油化工等众多领域的使用
• 出色的稳定性：选材精良，稳定耐用
质控说明
每批样品应测定10%的平行样品。
取样及储存运输
1、样品类型
样本建议3个生物学重复。
细胞，取样后离心，去除培养基，立即放入液氮中，之后-80°保存。
叶片、茎、花等，取下后立即放入液氮中，之后-80°保存。
果实的果肉、果皮等，如果野外现场不具备分离条件，需尽快(30MIN内)转移至室内，分离样品放入液氢中，之后-80°保存。
2、混合取样
每份样品混合来自至少3株以上的组织。以水稻叶片为例：取同一时期，表型基本一致的，同一个部位的1片叶片，同时取6株，放到的10M离心管中，并迅速放入液氮中。
3、样品重量和重复
新鲜的、干净的植物样品(鲜样)，样本建议量>1G，最少量>0.6G。准备3份及以上生物学重复。
4、储存和运输
采摘样品后立即用液氨速冻统一使用5ML或15ML质量较好的离心管(根据样本类型、大小选择离心管规格)装入样品，需足量的干冰运输至公司。所有盛装样品的管子需在常温下用记号笔清晰标注样品名称(勿在冷冻温度下标注)。另外，由于植物对损伤的应激反应会影响植物酶活性，为得到准确并符合预期的结果，尽量减少植物样品在常温下的暴露时间。
案例展示
过氧化氢酶（CAT）测定
测定原理
CAT广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H2O2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。
H2O2可与钼酸铵反应形成稳定的黄色复合物，在405nm处有强烈吸收峰，且其吸光值大小与过氧化氢浓度成正比。通过测定反应体系中剩余的H2O2量，得出被CAT催化分解的H2O2量，进而反映CAT的活性。
试剂
1）提取液：液体75mL×1瓶，4℃保存；
2）试剂一：液体15mL×1瓶，4℃保存；
3）试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；临用前取1瓶试剂二加入12.5mL蒸馏水，充分溶解。
4）标准品：液体0.5mL×1瓶；4℃保存；
30μmol/mL 标准液的配制：标准品置于试剂瓶内 EP 管中，使用前需先离心。本试剂盒所提供标准品为1mmol/mL H2O2标准溶液，临用前取0.15mL 标准品加入4.85mL 试剂一稀释或者根据样本量按照比例配制，充分混匀，即为30μmol/mL 标准液，现配现用，
实验步骤
1）粗酶液提取
按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1:5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）等液体样本：直接检测。
2）测定步骤
2）测定步骤
1、酶标仪预热30min以上，调节波长至405nm，蒸馏水调零。
2、测定前将30μmol/mL标准液与试剂一在25℃水浴 10min 以上。
3、加样表
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 空白管 | 标准管 |
样本（μL） | 20 | 20 | - | - |
提取液（μL） | - | - | 20 | 20 |
30μmol/mL标准液（μL） | 100 | - | - | 100 |
试剂一（μL） | - | 100 | 100 | - |
混匀，25℃水浴锅中准确反应10min。 | ||||
试剂二（μL） | 180 | 180 | 180 | 180 |
混匀，室温静置10min，取200μL于96孔板中测定405nm 处吸光值，分别记为A 测定、A对照、A 空白、A标准。计算 ΔA测定=A测定-A对照，ΔA标准=A标准-A空白，ΔA=ΔA标准-ΔA测定。 | ||||
结果计算
单位的定义：在25℃条件下，每g组织每分钟催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(U/g 鲜重)=（ΔA÷ΔA标准）×30×V标准÷（V样÷V样总×W）÷T×F
式中：
30：标准品浓度，30μmol/mL；
V 标准：加入标准液体积，0.1mL；
V 样：加入样本体积，0.02mL；
T：反应时间，10min；
F：样本稀释倍数；
V 样总：加入提取液体积，mL；
W：样本质量，g。
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