检测简介
维百瑞生物建立了一种基于LC-MS/MS平台的植物激素分析方法,高通量检测包括生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、茉莉酸、水杨酸在内的6大类植物激素。定量分析采用同位素稀释法,可获得植物激素绝对含量。通过高效的样品预处理技术对植物激素进行富集、纯化,结合超高效液相色谱(UPLC)出色的分离能力和串联质谱(MS/MS)的高选择性,可有效降低复杂的样品基质对检测的干扰,进而提高植物激素的检测灵敏度,确保分析结果的可靠性。
检测方法
同位素外标法
外标法:通过对照品浓度、峰高/面积和待测物的峰高/面积,计算待测物浓度。
用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
同位素内标法
内标法:通过内标物与对照品的浓度、峰高/面积计算校正因子,然后通过校正因子、待测物峰高/面积、内标物浓度、峰高/面积,计算待测物浓度;需要与待测物性质非常相似(如吸收系数、出峰位置,但是不能干扰待测物)的内标物。
是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校准和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。
内标法的优势
1、内标相当于一根标杆,利用化合物和内标的峰面积比值来定量,减小或消除了基质效应,定量更准确。
2、操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱,因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定,上样体积的变化不会影响影响定量结果。
3、内标法抵消了前处理的操作误差,乃至流动相、检测器的影响。
检测仪器
安捷伦1290高效液相色谱仪串联AB公司Qtrap6500质谱仪
1、高效液相色谱仪串联质谱的定义:高效液相色谱仪串联质谱法是一种将待测样品通过液相色谱分离后,流出液经接口部分或者全部进入离子源所产生的离子经过质量分析器,按照离子的质荷比大小分离并列谱的分析方法。
2、优势:三重四级杆——线性离子阱复合质谱系统,灵敏的定量系统,可以快速准确的对复杂基质中的多种待测物定量。具有分析范围广、分离能力强、定性分析结果可靠、检测限低、分析时间快等特点
3、QTRAP6500质谱仪采用新型加热方式,可在30秒内升温至750℃,可以针对不同的化合物设置不同的分析温度。在具备三重四级杆扫描的同时,还具备线性离子阱的同时定性和定量的多种扫描方式。在同一个样品分析多个化合物的情况下各离子之间不会相互干扰,稳定性和准确性都高。